更新時(shí)間:2024-07-05
細(xì)胞炎癥因子檢測(cè)試劑盒通?;诿嘎?lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)原理。該試劑盒包括特異性抗體和標(biāo)記物,用于檢測(cè)樣本中的炎癥因子水平。
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
細(xì)胞炎癥因子檢測(cè)試劑盒?采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被細(xì)胞炎癥因子試劑盒捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細(xì)胞炎癥因子呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
細(xì)胞炎癥因子檢測(cè)試劑盒通常基于酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)原理。該試劑盒包括特異性抗體和標(biāo)記物,用于檢測(cè)樣本中的炎癥因子水平。在ELISA中,樣本被加入到涂有特異性抗體的微孔板中,并與這些抗體結(jié)合。隨后,標(biāo)記物被加入到微孔板中,并與未結(jié)合的特異性抗體結(jié)合。通過加入底物產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng),可以測(cè)量標(biāo)記物的信號(hào)強(qiáng)度,從而確定樣品中炎癥因子的濃度。
一、試劑盒組成:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片 | 2片 | |
密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | |
酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 5ml×1瓶 | 10ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
20×濃縮洗滌液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
二、樣本處理要求:
1. 樣本應(yīng)從患者采集后立即處理,以避免因延遲處理而導(dǎo)致結(jié)果失真。
2. 樣本可以是血液、血清、血漿或組織等生物體內(nèi)的液體或組織。
3. 樣本應(yīng)在低溫條件下保存,以避免因長時(shí)間儲(chǔ)存而導(dǎo)致樣本降解。
4. 樣本應(yīng)避免多次凍融循環(huán),以避免因多次凍融而導(dǎo)致樣本降解。
5. 樣本應(yīng)根據(jù)試劑盒說明書的指導(dǎo)進(jìn)行前處理和稀釋。
6. 操作人員應(yīng)穿戴手套、口罩等個(gè)人防護(hù)裝備,并按照操作規(guī)范進(jìn)行樣本處理。
總之,樣本處理需要保證樣本的質(zhì)量和純度,以確保能夠得到可靠的檢測(cè)結(jié)果。
三、操作步驟:
1. 樣品處理:將待測(cè)樣品如血清、血漿或培養(yǎng)上清等加入試劑盒提供的孔板中。
2. 孔板處理:根據(jù)試劑盒說明書中所示方法,對(duì)孔板進(jìn)行洗滌和添加輔助試劑等處理,以保證測(cè)定的準(zhǔn)確性和精度。
3. 加入檢測(cè)試劑:在處理完孔板后,向每個(gè)孔加入特定的檢測(cè)試劑,如酶聯(lián)免疫吸附試劑盒(ELISA)中的抗體或底物等。
4. 孵育:將孔板置于適宜的溫度下(一般為37℃),靜置一定時(shí)間,使檢測(cè)試劑與待測(cè)樣品中的分子發(fā)生特異性作用。
5. 洗滌:將孔板中未與檢測(cè)試劑結(jié)合的雜質(zhì)物洗去,以避免誤差的出現(xiàn)。
6. 信號(hào)檢測(cè):對(duì)加入檢測(cè)試劑的孔,進(jìn)行信號(hào)檢測(cè),常見的包括熒光法、吸收法、放射免疫分析法等。
7. 數(shù)據(jù)分析:根據(jù)檢測(cè)儀器所測(cè)得的信號(hào)值,參照試劑盒說明書中的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算出待測(cè)樣品中特定分子的含量,并進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
需要注意的是,具體的操作步驟可能會(huì)因?yàn)椴煌脑噭┖卸兴町?,因此在使用前,一定要仔?xì)閱讀試劑盒說明書,并按照說明書中的方法進(jìn)行操作。
四、注意事項(xiàng):
1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。樣本在使用前也要在室溫平衡60分鐘。
2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間建議控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,建議做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6、底物請(qǐng)避光保存。
7、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9、本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。